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糞腸球菌瓊脂培養(yǎng)基的原理和使用方法

更新時間:2025-12-01   點擊次數(shù):69次

一、試驗用途及原理

  本培養(yǎng)基用于糞腸球菌選擇性分離培養(yǎng)。

  ?胨、酵母浸粉提供氮源、維生素和生長因子;麥芽糖、乳糖為可發(fā)酵糖類;甘油磷酸鈉為培養(yǎng)基碳源,也起到一定的緩沖作用;氯化鈉維持細菌平衡的滲透壓;疊氮鈉可抑制革蘭氏陰性菌生長;溴甲酚紫為指示劑染料;瓊脂是凝固劑。糞腸球菌能將TTC(氯化三苯基四氮唑)還原成一種酸性的偶氮染料,顯示為深紅色菌落。


二、培養(yǎng)基配方(g/L)

?胨

10.0

麥芽糖

20.0

酵母浸粉

10.0

甘油磷酸鈉

10.0

氯化鈉

5.0

乳糖

1.0

溴甲酚紫

0.015

疊氮鈉

0.4

TTC

0.1

瓊脂

13.0

pH7.3±0.2(25℃)


三、試驗方法

  1、稱取本品70.0 g,加熱溶解于1000 mL蒸餾水中,煮沸5分鐘,冷至50℃左右,傾入無菌平皿,備用。

  2、制備菌種懸液,接種到糞腸球菌瓊脂培養(yǎng)基上。

  3、放置于36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中,需氧培養(yǎng)48 h。


四、質控結果

  接種以下質控菌株,放置36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中,需氧培養(yǎng)48 h。菌株劃線培養(yǎng)結果見圖1,菌株涂布培養(yǎng)結果見圖2。

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

回收率

生長情況

其他特征

糞腸球菌

ATCC 29212

10-100

≥50%

+++

淡紅色小菌落

大腸埃希氏菌

ATCC 25922

/

/

-

抑制

鼠傷寒沙門氏菌

ATCC 14028

/

/

-

抑制

金黃色葡萄球菌

ATCC 25923

/

/

-

抑制


糞腸球菌瓊脂培養(yǎng)基的微生物質控結果(劃線培養(yǎng))

圖1 糞腸球菌瓊脂培養(yǎng)基的微生物質控結果(劃線培養(yǎng))

糞腸球菌瓊脂培養(yǎng)基的微生物質控結果(涂布培養(yǎng))

圖2 糞腸球菌瓊脂培養(yǎng)基的微生物質控結果(涂布培養(yǎng))




注:本文屬海博生物原創(chuàng),未經允許不得轉載。


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