一、試驗用途及原理
本培養(yǎng)基用于糞腸球菌選擇性分離培養(yǎng)。
?胨、酵母浸粉提供氮源、維生素和生長因子;麥芽糖、乳糖為可發(fā)酵糖類;甘油磷酸鈉為培養(yǎng)基碳源,也起到一定的緩沖作用;氯化鈉維持細菌平衡的滲透壓;疊氮鈉可抑制革蘭氏陰性菌生長;溴甲酚紫為指示劑染料;瓊脂是凝固劑。糞腸球菌能將TTC(氯化三苯基四氮唑)還原成一種酸性的偶氮染料,顯示為深紅色菌落。
二、培養(yǎng)基配方(g/L)
?胨 | 10.0 |
麥芽糖 | 20.0 |
酵母浸粉 | 10.0 |
甘油磷酸鈉 | 10.0 |
氯化鈉 | 5.0 |
乳糖 | 1.0 |
溴甲酚紫 | 0.015 |
疊氮鈉 | 0.4 |
TTC | 0.1 |
瓊脂 | 13.0 |
pH7.3±0.2(25℃) | |
三、試驗方法
1、稱取本品70.0 g,加熱溶解于1000 mL蒸餾水中,煮沸5分鐘,冷至50℃左右,傾入無菌平皿,備用。
2、制備菌種懸液,接種到糞腸球菌瓊脂培養(yǎng)基上。
3、放置于36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中,需氧培養(yǎng)48 h。
四、質控結果
接種以下質控菌株,放置36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中,需氧培養(yǎng)48 h。菌株劃線培養(yǎng)結果見圖1,菌株涂布培養(yǎng)結果見圖2。
質控菌株 | 菌株編號 | 接種量(CFU) | 回收率 | 生長情況 | 其他特征 |
糞腸球菌 | ATCC 29212 | 10-100 | ≥50% | +++ | 淡紅色小菌落 |
大腸埃希氏菌 | ATCC 25922 | / | / | - | 抑制 |
鼠傷寒沙門氏菌 | ATCC 14028 | / | / | - | 抑制 |
金黃色葡萄球菌 | ATCC 25923 | / | / | - | 抑制 |

圖1 糞腸球菌瓊脂培養(yǎng)基的微生物質控結果(劃線培養(yǎng))

圖2 糞腸球菌瓊脂培養(yǎng)基的微生物質控結果(涂布培養(yǎng))
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